期刊简介
本刊主要报道预防医学各学科的科研成果、实践经验、新技术、新方法、以及国内外最新科技信息，旨在促进预防医学事业的发展，为提高人民健康水平服务。本刊以广大预防医学工作者为主要对象。
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首页>河南预防医学杂志
- 杂志名称：河南预防医学杂志
- 主管单位：河南省卫生厅
- 主办单位：河南省预防医学会
- 国际刊号：1006-8414
- 国内刊号：41-1220/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
人细小病毒B19VP1基因片段原核表达载体的构建及其表达
孟炯；赵国强；赵新合
关键词：人细小病毒B19, VP1基因片段, 克隆, 表达
摘要：目的克隆人细小病毒B19 VP1基因片段,构建其重组克隆载体和表达载体,并诱导表达.方法利用聚合酶链反应(PCR)和分子克隆技术,将B19病毒VP1基因片段扩增后,构建pGEM-T-easy克隆载体;经PCR筛选后,亚克隆于pGEX-4T-1表达载体中,并转化至BL21感受态菌;经诱导剂异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并以免疫印迹法对表达蛋白进行鉴定.结果扩增出一条约801bp的基因片段,PCR鉴定结果的与预期结果一致.经IPTG诱导,VP1融合蛋白在大肠杆菌中得到成功表达,PAGE上出现相对分子量约为54KD的一条新生蛋白带,经蛋白印迹验证为表达蛋白B19VP1.薄层扫描现示,表达产物占菌体总蛋白的27.4%.结论获得人细小病毒B19VP1基因片段的原核表达载体及其产物,对进一步研究其纯化及B19疫苗有重要意义.
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